Аннотация:Цель работы -- получение макропористых композиционных ковалентно сшитых гидрогелей на основе природных полисахаридов (хитозана и гиалуроновой кислоты) с добавлением фиброина, и исследовании их структуры и физико-химических свойств, а также их биосовместимости in vitro в качестве биоразлагаемых матриксов для тканевой инженерии.
Задачи:
1) Получить гидрогели на основе Хит, ГК и Фб двумя методами (введением ГК по поверхности и в объем гидрогеля)
2) Изучить структуру гидрогелей (размер пор и распределение пор по размерам), а также физико-химические свойства в зависимости от химического состава и метода получения.
3) Оценить цитотоксичность гидрогелей на модельной линии клеток (мышиные фибробласты L929) in vitro.
4) Изучить рост и пролиферацию различных линий животных клеток, в том числе стволовых клеток (СК) человека при их длительном культивировании в композитных гидрогелях in vitro.
Результаты:
1. Получены макропористые ковалентно-сшитые дженипином композитные гидрогели на основе хитозана, гиалуроновой кислоты и фиброина двумя методами (введением ГК по поверхности и в объем гидрогеля).
2. Изучена структура гидрогелей, их физико-химические свойства. Гидрогели, полученные методом введения ГК по поверхности, имели более высокую степень набухаемости, чем матриксы, сформированные путем введения ГК в объем гидрогеля. Обнаружено, что матриксы, содержащие в своем составе Фб (ХитФб, ХитФб/ГК-s, ХитФб/ГК-v) имели меньший средний размер пор (189, 191 и 210 мкм, соответственно), чем гидрогели без фиброина (377, 452 и 352 мкм).
3. Изучена цитотоксичность гидрогелей в модели in vitro методом экстракт-теста. Показано, что все гидрогели нецитотоксичны.
4. Изучены особенности 3D роста и пролиферации клеток L929 и hTERT-MSC при их культивировании в гидрогелях ХитФб, ХитФб/ГК-s и ХитФб/ГК-v в модели in vitro в течение 7 дней. Показано, что все образцы гидрогелей поддерживали адгезию, рост и пролиферацию клеток. При этом в матриксах, содержащих ГК, пролиферация клеток была выше, а также введение Фб в состав Хит/ГК гидрогелей способствовало адгезии и распластыванию клеток.