|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
Интеллектуальная Система Тематического Исследования НАукометрических данных |
||
Бактериальная продукция вариантов аполипопротеина А1 человекадипломная работа (Бакалавр)
- Научные руководители: Люкманова Е.Н., Шенкарев З.О.
- Автор: Соложенкин Олег Игоревич
- Тип: Бакалавр
- Организация, в которой проходила защита: МФТИ
- Год защиты: 2008
- Аннотация: Аполипопротеин A1 является основным белковым компонентом липопротеиновых частиц высокой плотности. Эти частицы играют важную роль в транспорте холестерина в организме млекопитающих. Каждая липопротеиновая частица представляет собой диск диаметром ~10 нм и толщиной ~4 нм, содержащий фрагмент бислойной липидной мембраны, стабилизированный димером Аполипопротеина A1. На основе таких липопротеиновых частиц была создана новая перспективная мембраномоделирующая среда, названная «нанодиски» (NanoDiscs). Область возможного применения мембранных нанодисков огромна. Нанодиски могут использоваться в фундаментальных научных исследованиях, как универсальная среда для стабилизации и структурно-функциональных исследований мембранных белков и мембраноактивных пептидов. Применение нанодисков способно кардинально изменить современный подход к структурно-функциональным исследованиям мембранных белков. В отличие от широко применяемых в структурных исследованиях сферических мицелл и бицелл детергентов, каждый нанодиск содержит плоский фрагмент бислойной мембраны, что позволяет исследовать мембранные белки в окружении, близком к нативному. Небольшие размеры и высокая стабильность нанодисков позволяют использовать для исследований любые спектроскопические методы (включая ЯМР). Кроме того, полная доступность растворителю обоих сторон мембраны нанодиска (и, соответственно, встроенного в него белка) позволяет проводить функциональные исследования белков. Возможное применение нанодисков не ограничивается только стабилизацией мембранных белков для структурных и функциональных исследований. Интересным представляется использование нанодисков в качестве инструмента доставки лекарств гидрофобного происхождения в клетки-мишени (например, раковые опухоли), и в качестве носителя для доставки красителей в ткани при диагностических медицинских исследованиях (рентгеновской и магниторезонансной томографии). На данный момент в литературе описано применение в качестве таких транспортировщиков мицелл и липосом. Однако использование подобных наночастиц сопряжено с рядом трудностей: мицеллы стабильны в растворе (сыворотке крови) только при концентрациях выше ККМ (критическая концентрация мицеллообразования), а липосомы имеют слишком большие размеры (100-200 нм) для беспрепятственного проникновения в ткани организма. В связи с этим, благодаря высокой стабильности и небольшим размерам нанодисков, их использование для транспортировки лекарственных препаратов и диагностических красителей является весьма перспективным направлением. Разработка систем с использованием нанодисков открывает огромные перспективы и в области биотехнологии, например, для создания биокатализаторов и биореакторов на основе мембранных ферментов. В настоящей работе представлены результаты комплексного исследования нанодисков, сформированных на основе фрагмента Аполипопротеина A1 человека. В первой части работы были получены два изотопно-меченых варианта этого белка и исследована возможность изучения структуры липопротеиновых частиц высокой плотности методом гетероядерной ЯМР-спектроскопии. Вторая часть работы была посвящена разработке новых методов для исследования мембранных белков и пептидов, встроенных в мембраны нанодисков. Для этой цели было получено два мутантных варианта Аполипопротеина A1 содержащих ковалентно связанные хелатирующие группы.
- Добавил в систему: Люкманова Екатерина Назымовна