ПРИМЕНЕНИЕ СИСТЕМЫ ГЕНОМНОГО РЕДАКТИРОВАНИЯ CRISPR-CAS ДЛЯ АНАЛИЗА РЕГУЛЯЦИИ ГЕНА CXCR5 В КЛЕТКАХ РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ЧЕЛОВЕКА MCF-7дипломная работа (Специалист)
Аннотация:В настоящей работе была поставлена задача выявить возможные механизмы регуляции экспрессии гена cxcr5 в клетках рака груди человека в отсутствие белка p53 в норме и в условиях генотоксического стресса. Было продемонстрировано возможное участие белков семейства p53 (p63 и p73) в этом процессе. В качестве модельной системы были использованы клетки MCF-7, в которых экспрессируется p53 дикого типа. Для подавления p53 в MCF-7 помимо классической РНК-интерференции мы также применили технологию редактирования генома с помощью системы CRISPR-Cas, благодаря которой была создана клеточная линия MCF-7 с полностью неактивным р53. Данный метод был отработан и оптимизирован, что делает возможным его использование в дальнейшей работе, в частности для инактивации генов p63 и p73 с целью определения индивидуального вклада каждого из генов р53 семейства в регуляцию cxcr5.