|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
Интеллектуальная Система Тематического Исследования НАукометрических данных |
||
Роль взаимодействия компонента COPII окаймления белка Sec23 с белком динактинового комплекса p150-Glued в перемещении проколлагеновых везикул по микротрубочкамдипломная работа (Специалист)
- Научные руководители: Бродский И.Б., Надеждина Е.С.
- Автор: Черепушкин С.А.,
- Тип: Специалист
- Организация, в которой проходила защита: МГУ имени М.В. Ломоносова
- Год защиты: 2012
- Аннотация: Как было показано в недавних исследованиях, механизм регуляции отделения и перемещения везикул включает в себя фосфорилирование Sec23, влияющее на взаимодействие с белками-партнерами. Так, для слияния везикулы с цистерной аппарата Гольджи в клетках дрожжей Sec23 должен быть фосфорилирован киназой Hrr25p (дрожжевой аналог казеин киназы 1, изоформа дельта), а для связывания с Sar1 и для отпочкования везикулы от ЭПР, наоборот, дефосфорилирован. Обнаруженные сайты фосфорилирования консервативны у низших и высших эукариот, так что выглядит вполне вероятным, что фосфорилирование Sec23 играет регуляторную роль и в клетках млекопитающих, в частности, влияет на судьбу COPII везикулы после ее образования в ERES – направится ли она в ERGIC или, связавшись с моторным комплексом динеин-динактин, будет транспортирована напрямую к аппарату Гольджи. Для проверки этого предположения планируется исследовать влияние фосфорилирования Sec23а по двум рядом расположенным аминокислотным остаткам серина и треонина на связывание Sec23 с субъединицей динактинового комплекса p150Glued in vitro. Также планируется выяснить, влияет ли фосфорилирование Sec23 на транспорт COPII везикул in vivo. Подходящей экспериментальной моделью является транспорт проколлагеновых везикул, так как в норме везикулы, содержащие проколлаген, подвижны и транспортируются из ЭПР сразу в аппарат Гольджи. Визуализация движения отдельных везикул достаточно сложна, что связано с их небольшими размерами и коротким сроком жизни, поэтому перспективным подходом выглядит ингибирование транспорта на разных стадиях с помощью агентов химической природы и мутантов белков, участвующих в транспорте. В нашей лаборатории изучается конститутивно-активный мутант малой ГТФазы Sar1, экспрессия которого в клетках приводит к изменению внутриклеточной локализации ERES. В норме ERES распределены по всей цитоплазме, а при экспрессии мутантного Sar1 образуется плотный кластер из ERES в центральной области клетки. Процесс образования кластера – динеин-зависимый, что позволяет использовать его в качестве модели динеин-зависимого транспорта везикул.
- Добавил в систему: Бродский Илья Борисович