ИССЛЕДОВАНИЕ ВОЗМОЖНОСТИ РЕГИСТРАЦИИ КОНФОРМАЦИОННЫХ ИЗМЕНЕНИЙ ЕДИНИЧНЫХ МОЛЕКУЛ ФОРМИАТДЕГИДРОГЕНАЗЫ ИЗ PSEUDOMONAS SP. 101 С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ АТОМНО-СИЛОВОЙ МИКРОСКОПИИдипломная работа (Специалист)
Аннотация:В работе исследовали возможность регистрации изменений высоты иммобилизованной на поверхности белковой глобулы в ходе ферментативного катализа методом атомно-силовой микроскопии. Отработана методика измерения зависимости сигналов средней силы нажатия, амплитуды и сдвига фаз от времени при помещении зонда над молекулой фермента. С целью надежной регистрации целевого сигнала впервые проанализированы вклады всех мешающих компонент: вибраций и наводок электросети, а также выдвинуто предположение о мешающем влиянии низкочастотных латеральных колебаний. Исследованы морфология и ферментативная активность структур, формируемых путем адсорбции формиатдегидрогеназы из Pseudomonas sp. 101 из растворов на поверхностях ультрагладкого полистирола, а также слюды, модицифированной ПДДА, разветвленным ПЭИ или АПТМС. Показано, что несмотря на наличие фермента на данных поверхностях, активность его чрезвычайно низка, таким образом, иммобилизация данного фермента на гладких поверхностях, представляет собой не тривиальную задачу и требует дополнительных исследований.