Описание:Рассматриваются основные понятия, теоретическая база и методология генетической инженерии:
1. Клонирование в бактериальных клетках. Используемые ферменты,плазмиды, селективные маркеры. Блоттинг.
2. Полимеразная цепная реакция (ПЦР). Конструирование праймеров. Ферменты. Условия реакции. Случайный и сайт-направленный мутагенез. Применения ПЦР. Количественная (Real-time) ПЦР.
3. Библиотеки генов. Векторы, особенности работы с ними. Физическая карта генома человека. STS. Прогулка по хромосоме. Библиотеки кДНК.
4. Экспрессия генов в клетках дрожжей. Виды дрожжевых векторов, ориджины репликации, селективные маркеры, промоторы. Индуцибельные системы. Дрожжевая двугибридная система.
5. Получение рекомбинантных белков в бактериальных клетках. Используемые промоторы и их особенности. Тэги. Выделение и очистка рекомбинантных белков. Белковый сплайсинг. Трансдуцирующие пептиды.
6. Секвенирование НК. Принципы и подходы.
7. Gateway клонирование.
8. Экспрессия генов в клетках млекопитающих. Клеточные линии, промоторы, репортерные гены, внутриклеточная локализация белков. Ретровирусные и аденовирусные векторы. Нокаутирование генов.
9. Интерференция РНК. Механизм. Способы получения siRNA. Факторы, влияющие на эффективность трансляции в клетках прокариот и эукариот.
10. SELEX. Получение РНК и ДНК аптамеров.
11. Микрочиповые технологии.
12. Генная инженерия растений. Способы ведения чужеродных генов в растения. Получение и анализ трансгенных растений. Вирусные векторы.