ИСТИНА

При заражении вирусом в клетке появляются чужеродные молекулы, такие как вирусные белки и нуклеиновые кислоты. Производимые в чрезмерно больших количествах вирусные белки зачастую переполняют эндоплазматический ретикулум, вызывая ЭР-стресс. Одним из механизмов ответа клеток млекопитающих на ЭР-стресс является неканонический цитоплазматический сплайсинг мРНК транскрипционного фактора XBP1. Сдвиг рамки считывания приводит к синтезу функциональной формы транскрипционного фактора XBP1, активирующего ответ на неправильно свернутые белки и ЭР-стресс. Ранее в нашей лаборатории были созданы три варианта молекулярных сенсоров ЭР-стресса на основе последовательности мРНК XBP1 и кодирующей последовательности люциферазы P. plagiophthalamus (CBG), соединенных глицин-сериновым линкером: на основе полноразмерной кодирующей части мРНК XBP1 с одним интроном, претерпевающим неканонический цитоплазматический сплайсинг; на основе мРНК с двумя идентичными интронами; и на основе мРНК, кодирующей усеченную форму XBP1, с двумя идентичными интронами. Целью данной работы была проверка ранее полученных сенсоров ЭР-стресса на различных клеточных линиях человека с последующим воздействием низкомолекулярных веществ, вызывающих ЭР-стресс. В ходе работы показана воспроизводимая активация сенсоров на основе XBP1 в ответ на ЭР-стресс, вызываемый туникамицином и дитиотреитолом в клеточных линиях HEK293T и HeLa. Изучена динамика ответа на ЭР-стресс в зависимости от концентрации и механизма действия индуктора. Работа выполнена за счёт благотворительного пожертвования ООО «Компания Хеликон».