ИСТИНА

Множественная эндокринная неоплазия 2А (МЭН 2А) – это синдром с аутосомно-доминантным типом наследования, включающий медуллярный рак щитовидной железы (МРЩЖ) и феохромоцитому (ФХЦ). Распространенность МЭН 2А синдрома варьируется от 13 до 24 случаев на 1 млн. человек [2]. Одной из причин спонтанного роста опухолей является нарушение нормальной регуляции клеточного цикла. Анализ транскриптома единичных клеток позволяет увидеть экспрессионный профиль генов клеточного цикла в различных типах клеток. Следовательно, мы можем оценить, в каких фазах клеточного цикла находятся опухолевые клетки, и предположить появление новых злокачественных клеток при МЭН 2А синдроме у человека [1]. Для проведения исследования мы взяли 4 образца: по 1 случаю МРЩЖ и ФХЦ с синдромом МЭН 2А и по 1 случаю спорадического происхождения. Образцы были получены из операционного материала ГНЦ РФ ФГБУ «НМИЦ Эндокринологии» Минздрава РФ. Для каждого случая было проведено гистологическое и иммуногистохимическое исследование (ИГХ) на хромогранин А, Ki-67 и фосфогистон (PHH3). В результате секвенирования кДНК единичных клеток на платформе NovaSeq 6000 (Illumina, США) было проанализировано 29679 клеток. При исследовании тканеспецифичных генов были идентифицированы 7 основных клеточных типов: фолликулярные клетки, хромаффинные клетки, T-клетки, B-клетки, макрофаги, эндотелиальные и мезенхимальные клетки. Мы построили точечные диаграммы для генов, участвующих в регуляции клеточного цикла нейроэндокринных опухолей. Была обнаружена повышенная экспрессия генов CCND1, RAD9A, OGFR, MIF и UBC. Она была отражена на графиках нелинейного снижения размерности (UMAP) для каждого образца. Мы обнаружили субкластер фолликулярных клеток в переходном состоянии в образце МРЩЖ в рамках МЭН 2А синдрома. В данном кластере наблюдали повышенную экспрессию CCND1, отвечающего за переход фаз G1-S, и MIF, участвующего в регуляции иммунного ответа и регуляции фаз S, G2-M клеточного цикла. Также была обнаружена повышенная экспрессия UBC – гена, регулирующего транскрипцию и репарацию ДНК, отвечающего за деградацию ингибиторов циклин-зависимых киназ, циклинов и анафазы. При анализе результатов как гистологического, так и ИГХ исследования были обнаружены признаки высокой пролиферативной активности этих опухолевых клеток. Наличие в данном кластере повышенной экспрессии генов-регуляторов клеточного цикла и высокий индекс Ki-67 (5%) говорят о высокоагрессивном потенциале данного клеточного субкластера.