ИСТИНА

Амперометрические биосенсоры на основе тирозиназы помимо непосредственного анализа фенолов могут быть также использованы для измерения активности ферментов, испоьзующих производные фенолов в качестве субстратов. Целью настоящей работы является повышение чувствительности графитовых пастовых электродов на основе тирозиназы путем медиаторной модификации, а также их использование для измерения активности ферментов-индикаторов отравления токсичными фосфороорганическими соединениями, бутирилхолинэстеразы (БХЭ) и нейротоксичной эстеразы (НТЭ) крови человека. Графитовые пвстовые электроды на основе тирозиназы модифицировались введением в их состав нового светостабильного медиатора, метилсульфата метоксиметилфеназония (МСМФ). Были оптимизированы конструкция электродов и содержание медиатора и тирозиназы в пасте. Были подробно изучены зависимости ответов электродов от прилагаемого потенциала, рН и ионной силы, а также их операционная и долговременная стабильность. Медиаторная модификация электродов привела к увеличению их чувствительности в 4 раза по сравнению с безмедиаторными. Предел детекции составли 25 нМ при соотношении сигнал/шум = 2. Модифицированные электроды в течение дня работали без потери активности с ошибкой менее 3% и сохраняли около 70% начальной активности в течение 2 недель. При хранении в сухом виде при 4⁰С они не теряют своих характеристик более 12 месяцев. Использование модифицированных электродов позволило измерить активность НТЭ и БХЭ в многократноразбавленных образцах крови человека. Пределы чувствительности для НТЭ и БХЭ составили 0,8 и 0,6 мU, соответственно.