ИСТИНА

Иммуномечение позволяет решить проблему идентификации белоксодержащих объектов, исследуемых с помощью просвечивающей электронной микроскопии. Суть метода заключается в выявлении специфичных антигенов на поверхности образца с помощью первичных антител и последующего проявления этих антител конъюгатами на основе наночастиц золота. Однако, иммуномечение редко применяют на практике, так как оно представляет собой трудоёмкую процедуру, занимающую 3–5 часов. Нам удалось адаптировать методику, чтобы сократить время до ~2 часов за счёт уменьшения времени шагов инкубации, блокировки и отмывки; в качестве проявляющего агента использовали конъюгаты коллоидного золота с белком А. Наша методика была использована для исследования двух образцов – внеклеточных везикул из среды культивирования клеток MCF7 и инактивированного вируса полиомиелита типа I штамма Sabin. В обоих случаях специфичность связывания составила более 85%. Оптимизированная методика иммуномечения в дальнейшем может быть полезна для исследования широкого круга биологических объектов.