ИСТИНА

Активные формы кислорода (АФК) обладают множеством сигнальных функций в клетках, в том числе принимают участие в регуляции тонуса сосудов. Одним из основных источников АФК в клетках сосудов является NADPH-оксидазный ферментативный комплекс (NOX). Вазомоторная роль продуцируемых NOX АФК исследована для взрослого организма, чего нельзя сказать о периоде раннего постнатального онтогенеза. При этом важно отметить, что механизмы регуляции тонуса сосудов в новорожденный период существенно отличаются от таковых во взрослом возрасте. Таким образом, целью исследования стало оценить вклад продуцируемых NOX АФК в регуляцию тонуса артерий в периоде раннего постнатального онтогенеза, а также изучить механизмы их вазомоторного влияния. Основным объектом исследования была подкожная артерия 10-15-дневных и взрослых самцов крыс Wistar. Исследовали сократительные ответы артерии на агонист α1 адренорецепторов метоксамин в изометрическом режиме с использованием системы wire myograph, продукцию супероксидного анион-радикала (O2•-) в данной артерии методом тканевой хемилюминесценции, а также содержание мРНК и белка каталитических субъединиц NOX в ткани артерий методами ПЦР в реальном времени и Вестерн блоттинга, соответственно. Мы показали, что как базальная, так и стимулированная NADPH продукция O2•- значительно выше в артериях крысят по сравнению со взрослыми крысами; пан-ингибитор NOX VAS2870 (10 мкМ) снижал вызванную NADPH продукцию O2•- в сосудах крысят. Среди всех изоформ NOX, мРНК каталитической субъединицы второй изоформы (NOX2) была наиболее представлена в сосудах как крысят, так и взрослых крыс. Содержание белка NOX2 было существенно выше в ткани артерий крысят по сравнению со взрослыми животными. В функциональных экспериментах на изолированных сегментах подкожной артерии VAS2870 не оказывал влияния на вызванные метоксамином сократительные реакции артерий взрослых крыс, тогда как значительно снижал их в артериях крысят. Важно отметить, что эффекты VAS2870 в артериях крысят наблюдались и после удаления эндотелия. Селективный ингибитор NOX2 GSK2795039 (10 мкМ) также выраженно ослаблял сократительные ответы артерий крысят. Наконец, эффект VAS2870 сохранялся в присутствии ингибиторов Rho-киназы (Y27632, 3 мкМ), протеинкиназы C (PKC, GF109203X, 10 мкM) или Src-киназы (PP2, 10 мкМ), но не в присутствии блокатора потенциал-управляемых Ca2+ каналов L-типа (LTCC, нимодипин, 0.1 мкМ). Таким образом, продуцируемые NOX (преимущественно – NOX2) АФК обладают выраженным проконстрикторным влиянием в подкожной артерии крыс в периоде раннего постнатального онтогенеза, но не во взрослом возрасте, что связано с высоким содержанием этого фермента в сосудах крысят. Механизм проконстрикторного влияния продуцируемых NOX АФК связан с активацией LTCC, но не Rho-киназы, PKC и Src-киназы. Исследование поддержано грантом Российского научного фонда (№ 23-25-00056).