ИСТИНА

Создание штаммов – продуцентов технических ферментов Синицын А.П.1, О. А. Синицына О.А.1, Рожкова А.М.2, Зоров И.Н. 1, Рубцова Е.А.2, Шашков И.А.2, Сатрутдинов А.Д.2, Цурикова Н.В.3, Костылева Е.В.3, Середа А.С.3, Великорецкая И.А.3 1Химический факультет, МГУ имени М.В. Ломоносова, Москва, Россия 2ФИЦ Биотехнологии РАН, Москва, Россия 3ВНИИПБТ – филиал ФИЦ питания, биотехнологии и безопасности пищи РАН, Москва, Россия Микроскопические грибы широко применяются для промышленного производства технических ферментов. Для получения высокоактивных штаммов – продуцентов таких ферментов мы использовали два подхода: индуцированный мутагенез и методы генетической инженерии. В результате γ-мутагенеза получены штаммы грибов рода Trichoderma – продуценты целлюлаз, ксиланаз и пектиназы, позволяющие получать в культуральной жидкости (КЖ) до 35-40 г/л внеклеточного белка. С помощью комбинированного УФ- и γ-мутагенеза получен штамм Aspergillus awamori с увеличенной продукцией глюкоамилазы. Создана система экспрессии Penicillium verruculosum В1-537 (ΔniaD), позволяющая трансформировать реципиентный штамм экспрессионными конструкциями, содержащими целевые гетерологичные или гомологичные гены, функционально связанные с индуцибельным промотором и терминатором гена мажорного секреторного белка целлобиогидролазы I (cbh1) P. verruculosum. Реципиентный штамм P. verruculosum характеризуется высокой секреторной способностью (до 60 г/л внеклеточного белка в КЖ). Сконструированы рекомбинантные штаммы – продуценты целлюлаз, β-глюканаз, ксиланаз, фитазы, кислой протеазы, пектин-лиазы, β-глюкозидазы, экзо- и эндо-инулиназ. Созданные продуценты различных ферментов используются для их промышленного производства на заводе ООО «Агрофермент».