ИСТИНА

Одна из проблем лечения хронического миелоидного лейкоза (ХМЛ) – недостаточная эффективность ингибиторов тирозинкиназы Bcr-Abl. С использованием молекулярного моделирования создан новый ингибитор PF-114, показавший эффективность в доклинических испытаниях при мутациях Abl. Цель работы - изучение механизмов гибели клеток ХМЛ (линия К562) при действии PF-114. Установлено, что гибель клеток К562 вызывается наномолярными концентрациями ингибитора. Для Bcr-Abl-негативных лейкозов PF-114 значительно менее активен. PF-114 вызывает снижение доли клеток с фосфорилированным адапторным белком CrkL - субстратом Bcr-Abl. В первые 24 ч PF-114 вызывает блок клеточного цикла в фазе G1, снижение активности митогенактивируемых протеинкиназ, нарушение фосфорилирования транскрипционных факторов семейства STAT, дефосфорилирование проапоптотического белка Bad и других митохондриальных белков. Доля клеток, теряющих электрический трансмембранный потенциал митохондрий, увеличивается к 48 ч, одновременно нарастает доля Аннексин V-положительных клеток. Через 48 ч регистрировали активацию каспаз 3 и 9 и протеолиз поли(АДФрибоза)полимеразы. События, вызванные PF-114, завершаются межнуклеосомной фрагментацией ДНК. Таким образом, инактивация тирозинкиназы Bcr-Abl новым ингибитором PF-114 вызывает многочисленные нарушения внутриклеточного сигналинга, завершающиеся апоптотической гибелью. Эти механизмы значительно менее выражены при повышении концентрации клеток в культуре: активируются факторы ограничения гибели. Работа поддержана грантом Минобрнауки Российской Федерации (Соглашение 14.W03.31.002 с Институтом биологии гена РАН).