ИСТИНА

Флуоресцентные белки (FPs) и их улучшенные мутантные варианты широко используются при изучении молекулярных основ жизнедеятельности клетки и различных процессов в медицине. Огромное разнообразие спектральных свойств FPs, спектры эмиссии которых заполняют весь видимый диапазон от синей до дальней красной области, определяется наличием уникального хромофора, образованного из трех собственных аминокислот. Высокий квантовый выход флуоресценции хромофора возможен лишь тогда, когда он погружен в жесткую белковую глобулу. Реакции хромофора в возбужденном состоянии, такие как перенос протона, приводящие к большому сдвигу Стокса у ряда FPs обусловлены взаимодействием хромофора с аминокислотами его микроокружения. Важно, что сам синтез хромофора становиться возможным лишь после того, как сформирована нативная пространственная структура вокруг хромофор-образующих аминокислот и правильным образом расположены аминокислоты, катализирующие и направляющие синтез хромофора. Поэтому изучение процессов сворачивания FPs представляет большой интерес. В данной работе выполнено изучение процессов разворачивания–сворачивания и структуры переходного состояния зеленого флуоресцентного белка sfGFP (super folder GFP), под действием гуанидинтиоцианата (GTC) с использованием ряда методов молекулярной спектроскопии, включая абсорбционную спектроскопию, собственную флуоресценцию и флуоресценцию зеленого хромофора, а также метода гель-хроматографии.