ИСТИНА

Флуоресцентные методы являются незаменимыми для решения фундаментальных задач клеточной и молекулярной биологии, таких как прижизненная визуализация процессов, происходящих в отдельных клетках и в целом организме с высоким разрешением в реальном масштабе времени. Развитие методов флуоресцентной микроскопии опирается, в том числе, на создание и постоянное усовершенствование белковых флуоресцентных маркеров (FPs). Маркеры, созданные на основе бактериальных фитохромов, использующие в качестве хромофорной группы биливердин (BV), имеют на сегодняшний день наиболее длинноволновые спектры поглощения и флуоресценции, попадающие в ближне-инфракрасную (NIR) область спектра, где биологические ткани обладают наибольшей прозрачностью. Было выполнено исследование флуоресцентных свойств димерных NIR FPs iRFP670, iRFP682 и iRFP713 и мономерного BphP1-FP и их мутантных форм, имеющих цистеиновые остатки, способные связывать BV, как в PAS так и GAF доменах (Сys 15 и Сys 256, соответственно), имеющие цистеиновые остатки только в одном из этих доменов, и не имеющие цистеиновых остатков Сys 15 и Сys 256. Было показано, что на флуоресцентные свойства и стабильность NIR FPs существенное влияние оказывают аллостерические взаимодействия между доменами и мономерами белка.