ИСТИНА

Метаболомика, активно развивающаяся область науки, основанная на определении низкомолекулярных органических веществ – маркёров биохимических процессов в живых системах. Обнаружение, идентификация и последующее определение таких веществ представляют научный и практический интерес. Эти вещества могут быть использованы и при диагностике различных патологий в организме человека. При этом возможно применение инвазивной (кровь, сыворотка крови, клетки тканей) и неинвазивной диагностики (конденсат выдыхаемого воздуха). Часть таких соединений термостабильны и летучи и их можно разделить и обнаружить методом газовой хроматографии с различными детекторами непосредственно. Большинство же таких соединений – это высокополярные вещества, в том числе и нелетучие и для их обнаружения методом газовой хроматографии необходим (или целесообразен) предваряющий анализу перевод в термостабильную и летучую форму (дериватизация). Часто содержание биомаркеров находится в образце на низком уровне. В этом случае, а особенно в случаях поиска потенциальных, заранее неизвестных биомаркеров для обнаружения искомых веществ или их производных помогает метод газовой хроматографии в сочетании с масс-спектрометрией электронной и химической ионизацией. Метод ГХ-МС позволил обнаружить в конденсате выдыхаемого воздуха десятки термостабильных и летучих органических веществ, из которых удалось выделить маркеры таких заболеваний, как хроническая обструктивная болезнь лёгких и астма. Селективное и чувствительное определение таких низкомолекулярных веществ, как моносахариды, аминокислоты, нуклеозиды, жирные и дикарбоновые кислоты, фенил-карбоновые кислоты в различных средах удалось осуществить методом ГХ-МС благодаря выбору условий получения термостабильных и летучих производных этих веществ. Для этого использовали различные дериватизирующие агенты (в основном, для силилирования определяемых веществ). Полученные производные удалось не только селективно отделить друг от друга, но и выбрать в соответствующих масс-спектрах характеристичные значения m/z, отражающие особенности строения определяемых веществ, позволяющие определить молекулярные массы, выделить хроматографические пики следов веществ на масс-хроматограммах. В случае разработки методов диагностики патологических биохимических процессов в организме помимо использования идентифицированных соединений представляет интерес и использование массива неидентифицированных веществ, аналитические сигналы которых (например, масс-спектр электронной ионизации) позволяют отличить патологию от нормы. Применение метода ГХ-МС для анализа производных низкомолекулярных органических веществ, помимо получения наиболее воспроизводимых на сегодняшний день масс-спектров электронной ионизации позволяет «сузить» многообразие химических свойств полярных органических веществ (и их особенности поведения в хроматографической системе в случае использования ВЭЖХ) превратив их в относительно неполярные производные, которые эффективно разделяются на капиллярных колонках.