ИСТИНА

Поиск безопасных активаторов генетической программы антиоксидантного ответа, запускаемой транскрипционным фактором Nrf2 – одно из наиболее популярных направлений разработки лекарственных препаратов для хронических нейродегенеративных заболеваний. Было проведено тестирование библиотеки, состоящей из 40 соединений различных скаффолдов – производных аспирина, с помощью клеточного репортера Neh2-luc, с целью идентификации соединений, активирующих Nrf2 посредством прямой стабилизации белка Nrf2 за счет разрушения белок-белкового взаимодействия Nrf2-Keap1. Библиотека имела в составе три типа соединений: «пролекарства», образующие хинон метид в качестве промежуточной формы, либо высвобождающие фумарат, и их гибридный вариант, сочетающий оба механизма. Большинство аспирин-содержащих соединений обладало про-алкилирующим или про-оксидантным структурным мотивом и поэтому проявляло токсичность при высоких концентрациях. Тем не менее, среди активных соединений удалось идентифицировать молекулу, структурно схожую с хорошо-известным активатором вытеснения Nrf2 - бис-1,4-(4-метоксибензилсульфонамид)нафталином (NMBSA). Сравнение нового соединения с NMBSA и его улучшенным вариантом в репортерном анализе показало отсутствие тушения N-ацетил-цистеином, что указывало на механизм стабилизации Nrf2 без алкилировани я цистеинов. Новый активатор значительно превосходил по эффективности NMBSA в репортерном анализе. Компьютерное моделирование предсказывало улучшенные параметры докинга для деацетилированных вариантов идентифицированного нового «пролекарства». Кинетика активации репортера под действием нового препарата показывала продолжительный индукционный период, что также указывало на возможную внутриклеточную биотрансформацию препарата, приводящую к образованию активного продукта. Инкубирование нового соединения с плазмой крови или бесклеточным экстрактом репортерной линии нейробластомы, по результатам хромато-масс-спектрометрии приводило к постадийному деацетилированию. Таким образом оказалось, что катализируемый эстеразой гидролиз нового «пролекарства» деацетилирует аспириновые заместители и генерирует мощный активатор Nrf2. Открытый механизм активации «пролекарства» позволяет рассматривать новое соединение как многообещающий старт для последующих работ по его оптимизации. Работа проведена при поддержке Российского Научного Фонда (проект #20-15-00207).