ИСТИНА

Перспективными неподвижными фазами для гидрофильной хроматографии (ГИХ) являются фазы, содержащие амидные группы, которые обладают меньшей реакционной способностью по сравнению с аминогруппами, в тоже время обеспечивая высокую полярность функционального слоя. На текущий момент синтез новых селективных неподвижных фаз для ГИХ требует сложных многостадийных процедур ковалентного модифицирования, в то время как многокомпонентные реакции позволяют получать конечный продукт в одну стадию, при этом давая разнообразие возможностей в изменении структуры функционального слоя путем варьирования исходных соединений. На выход реакции и степень покрытия матрицы новым функциональным слоем существенное влияние может оказывать используемый растворитель и катализатор. В данной работе для получения новых гидрофильных сорбентов использовали многокомпонентную реакцию Уги с участием 3-аминопропилсиликагеля, ацетона, уксусной кислоты и различных изоцианидов: этилизоцианацетата и морфолиноэтилизоцианида. Для увеличения выхода реакции модифицирования варьировали растворитель, используя этанол и метанол, а также добавляли хлорид аммония в качестве катализатора. В результате сравнения данных по разделению модельных смесей полярных соединений: азотистых оснований и нуклеозидов, сахаров, водорастворимых витаминов, аминокислот и органических кислот, а также данных теста Танака для гидрофильных фаз, было установлено, что использование этанола в качестве растворителя, а также добавления катализатора в синтезе сорбента по реакции Уги приводит к увеличению факторов удерживания полярных аналитов и к уменьшению анионообменной селективности, что свидетельствует об увеличении степени покрытия исходной матрицы 3-аминопропилсиликагеля получаемыми функциональными группами. Для всех изученных классов аналитов эффективность в случае новых сорбентов существенно возрастала по сравнению с матрицей. Так, при добавлении катализатора в синтезе сорбента с более гидрофильным 2-морфолиноэтилизоцианидом время разделения модельной смеси 5 нуклеозидов и 6 азотистых оснований: аденозина, гуанозина, цитидина, уридина, 2’-дезоксиуридина, аденина, гуанина, тимина, цитозина, урацила, ксантина, - увеличивалось на 5 минут, при этом также наблюдали увеличение эффективности до 40000 тт/м при элюировании составом: ацетонитрил / 20 мМ аммонийно-ацетатный буферный раствор, pH 4,7 90/10 об.%; скорость потока 1 мл/мин; спектрофотометрическое детектирование при 254 нм, размеры колонок 100×3 мм). Возможность разделения смесей полярных соединений различных классов на одном сорбенте, а также подвижная фаза с большим содержанием ацетонитрила делают данный подход привлекательным для сочетания с масс-спектрометрическим детектированием. В работе выбраны условия разделения и определения сахаров и водорастворимых витаминов методом ВЭЖХ-МС. Показана применимость новых сорбентов и предложенных способов определения к анализу реальных объектов.