ИСТИНА

Актуальность. BRCA1 поддерживает стабильность генома, участвуя в репарации двухцепочечных разрывов в молекуле ДНК путём гомологичной рекомбинации. Нарушение функционирования белка BRCA1, обусловленное эпигенетической регуляцией экспрессии гена BRCA1, ассоциировано с развитием спорадических форм рака молочной железы (РМЖ) и рака яичников. Цель. Целью исследования явилось изучение влияния фитоэстрогенов, эстрогенов и антиэстрогенов на экспрессию BRCA1, а также эстрогеновых рецепторов α (ЭРα) в клетках гормонозависимого РМЖ линии MCF-7. Материалы и методы. Количественную оценку экспрессии BRCA1 и ЭРα в клетках гормонозависимого РМЖ линии MCF-7 проводили иммунофлуоресцентным методом, ассоциированным с проточной цитофлуориметрией. Использованы первичные антитела к BRCA1 (SD118), ЭРα (SP-1) и вторичные – DyLight 650 (все антитела фирмы Abcam). Измерения проводили на проточном цитофлуориметре Navios (Beckman Coulter). Параметры экспрессии маркеров оценивали методом Колмогорова-Смирнова. Индекс экспрессии маркеров рассчитывали как произведение доли специфически флуоресцирующих клеток относительно контроля (инкубация только с вторичными антителами) и интенсивности экспрессии (отношение интенсивности специфической флуоресценции к показателю в контроле). Результаты. 1. При воздействии фитоэстрогена генистеина в концентрации 0,5 мкМ отмечено увеличение индекса экспрессии BRCA1 в 1,6 раза, а для ЭРα – уменьшение показателя в 2,9 раза. При воздействии генистеина в бóльших концентрациях (10 мкМ и 15 мкМ) эффект фитоэстрогена на экспрессию BRCA1 был незначительным (индекс экспрессии BRCA1 увеличился в 1,3 и 1,2 раза, соответственно), при этом отмечено дозозависимое снижение экспрессии ЭРα – индекс экспрессии ЭРα снизился в 4,1 и 5,6 раз, соответственно. 2. Фитоэстрогены нарингенин (20 мкМ), кверцетин (20 мкМ) и апигенин (15 мкМ) не повлияли на экспрессию BRCA1, при этом индекс экспрессии ЭРα уменьшился в 2,6; 2,3 и 2,5 раз, соответственно. 3. Эстроген 17β-эстрадиол (10 нМ) снизил индекс экспрессии ЭРα в 4,3 раза, а антиэстроген тамоксифен (5 мкМ) – 1,6 раза, при этом изменений в экспрессии BRCA1 не отмечено. Выводы. В клетках гормонозависимого рака молочной железы линии MCF-7 продемонстрировано увеличение экспрессии опухолевого супрессора BRCA1 при воздействии фитоэстрогена генистеина. Выявлено воздействие генистеина на экспрессию BRCA1 и ЭРα – увеличение экспрессии vs уменьшения показателя, что указывает на существование взаимной регуляции BRCA1 и ЭРα. В то же время, уменьшение экспрессии ЭРα при воздействии других фитоэстрогенов (нарингенин, кверцетин и апигенин) не повлияло на экспрессию BRCA1, что свидетельствует о существовании различных механизмов регуляции этих опухолевых маркеров. Поддержано грантом РНФ 14-15-00362.