ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
Интеллектуальная Система Тематического Исследования НАукометрических данных |
||
Введение. Астроциты - глиальные клетки мозга, играющие важную роль в регуляции системы врожденного иммунитета центральной нервной системы (ЦНС) и связанных с этой системой воспалительных процессов. Одним из основных компонентов системы врожденного иммунитета являются Толл- подобные рецепторы (TLR), способные отвечать как на экзогенные, так и на эндогенные стимулы. Гиалуроновая кислота (HA), ключевой компонент внеклеточного матрикса, способна активировать TLR4. Известно, что 4- метилумбеллиферон (4-MU), ингибитор синтеза гиалуроновой кислоты, влияет на воспалительный ответ разных типов клеток, однако его действие на клетки ЦНС не изучено. Цель. Изучение противовоспалительных свойств 4-MU при активации TLR4 астроцитов. Материалы и методы. Первичные астроциты выделяли из мозга новорожденных крысят. Клетки инкубировали 30 минут с ингибитором синтеза HA 4-MU (10, 100 и 400 μM), затем стимулировали агонистом TLR4 липополисахаридом (LPS, 100 ng/ml) в течение 4 или 24 часов. Методом ПЦР в реальном времени оценивалась экспрессия генов маркеров воспаления (iNOS, TNF-a, IL-1a, IL-6, C3, IL-10). Концентрация HA в супернатанте и количественное содержание TNF-a, IL-1a, IL-6 измерялись методом иммуноферментного анализа. Результаты. Стимуляция LPS индуцирует экспрессию провоспалительных генов (iNOS, TNF-a, IL-1a, IL-6, C3) и противовоспалительного гена интерлейкина IL-10. Ингибитор 4-MU в концентрации 400 μM снижает LPS-индуцированную экспрессию TNF-a, IL-6, не оказывает влияние на экспрессию генов C3 и iNOS, повышает экспрессию IL-10. Для TNF-a, IL-10 и IL-6 изменение экспрессии на уровне мРНК подтверждено изменениями на уровне белка. Показано также, что стимуляция LPS приводит к накоплению HA во внеклеточной среде, причем эффект зависит от длительности стимуляции. При обработке 4-MU наблюдается снижение концентрации HA, зависящее от концентрации ингибитора. Выводы. На уровне клеточного ответа астроцитов обнаружена противовоспалительная активность 4-MU. Это позволяет оценить ингибитор 4-MU как перспективный препарат для лечения заболеваний ЦНС, сопровождаемых развитием воспалительных процессов. Исследование выполнено при финансовой поддержке гранта РНФ No 16-15-10298.