ИСТИНА

Функционируя в качестве скорость-лимитирующего фермента цикла Кребса, продуцирующего НАДН для окислительного фосфорилирования, мультиферментный 2-оксоглутаратдегидрогеназный комплекс (ОГДК) также способен генерировать активные формы кислорода в ходе различных побочных реакций [1]. Интенсивность протекания таких побочных реакций зависит от множества факторов, что осложняет оценку роли ОГДК в регуляции редокс-метаболизма клеток и тканей. Целью данной работы является исследование роли ОГДК в редокс-состоянии мозга крысы в норме и патологии (травме спинного мозга) путем использования селективных ингибиторов данного ферментного комплекса [2]. Известно, что активность ОГДК связана с уровнем глутатиона и его предшественника глутамата [1, 3, 4]. Редокс-состояние клетки и ее глутатионового буфера также зависит от генерации окиси азота из аргинина, маркером которого является второй продукт данной реакции - цитруллин. Поэтому для характеристики вклада ОГДК в редокс-состояние были измерены содержания указанных форм глутатиона и его аминокислотных предшественников, а также аминокислот цикла мочевины, вовлеченных в биосинтез NO. В условиях нормального метаболизма, ингибирование ОГДК приводит к падению уровня восстановленного глутатиона и увеличению уровня окисленного, что соответствует антиоксидантной роли данного фермента. Однако при метаболизме мозга с высоким уровнем активности ОГДК, активность отрицательно коррелирует с уровнем восстановленного глутатиона и положительно – с уровнем его окисленной формы. Данные корреляции согласуются с прооксидантной ролью ОГДК. Введение ингибитора ОГДК на фоне травматических повреждений нервной системы, ведущих к падению редокс-потенциала глутатиона, уже не изменяет уровней восстановленного и окисленного глутатиона. Однако цитруллин снижается под действием ингибиторов ОГДК как в физиологических, так и патофизиологических условиях, причем в последнем случае такое падение выражено гораздо сильнее. Ввиду недавних данных о взаимосвязи функции белка p53 и ОГДК в регуляции редокс- метаболизма клеток [5], методом вестерн-блоттинга оценили экспрессию р53 и его ацетилированной формы. Результаты свидетельствуют, что после травмы спинного мозга происходит снижение уровня ацетилированного p53 в головном мозге, усиливающееся при ингибировании ОГДК. Обнаружена положительная корреляция между уровнями общего p53 и активностью ОГДК у животных, перенесших травму, тогда как у контрольных животных активность ОГДК коррелирует с уровнем ацетилирования р53. Таким образом проведенное исследование свидетельствуют о двойственном вкладе ОГДК в редокс-состояние мозга и потенциальной зависимости данного вклада от уровня р53 и его ацетилирования. Работа выполнена под руководством д.х.н. В.И.Буник и поддержана грантом РНФ № 18-14-00116.