ИСТИНА

Гидрофильная хроматография (ГИХ) — современный метод определения полярных веществ на полярных неподвижных фазах, обеспечивающий иную селективность по сравнению с другими хроматографическими методами. В настоящее время в ГИХ используют неподвижные фазы разной химической природы, среди которых наибольшую гидрофильность и факторы удерживания полярных аналитов обеспечивают амидные неподвижные фазы. Однако, в связи с усложнением задач, решаемых гидрофильной хроматографией, создание новых неподвижных фаз с улучшенной и альтернативной селективностью остается одним из основных направлений развития метода. Макроциклические антибиотики, такие как эремомицин и ванкомицин, представляют собой наиболее часто используемые хиральные селекторы в высокоэффективной жидкостной хроматографии. Ранее не было работ, демонстрирующих их применение в режиме ГИХ для создания новых полярных неподвижных фаз. Однако, такие макромолекулы содержат большое количество гидрофильных функциональных групп, таких как карбоксильные и аминогруппы. Вследствие чего, применение антибиотиков для создания новых функциональных слоев может привести к увеличению гидрофильности получаемых сорбентов, а разнообразие групп на поверхности неподвижных фаз обеспечит альтернативную селективность. Использование молекул большого размера может также способствовать эффективному экранированию матрицы. Селективность разделения в гидрофильном режиме можно регулировать путем изменения не только структуры функционального слоя, но и способа его прикрепления к матрице. Поэтому в ходе работы оценивали также влияние длины и структуры спейсера на хроматографические свойства новых сорбентов. В работе изучали два сорбента на основе силикагеля с иммобилизованным антибиотиком эремомицином. Хиральный сорбент (Диасфер-110-Ere, ЗАО «БиоХимМакСТ») впервые использовали в гидрофильном режиме для определения полярных соединений: сахаров, витаминов, аминокислот и органических кислот. Также синтезировали сорбент на основе аминопропилсиликагеля с пространственным удалением функционального слоя, содержащего макроциклический антибиотик эремомицин, от поверхности матрицы с помощью спейсера — 1,4-бутандиолдиглицидилового эфира. Селективность сорбентов и вклад различных типов вторичных взаимодействий оценивали с помощью теста Танака для гидрофильных неподвижных фаз. Увеличение гидрофильности функционального слоя сорбента с иммобилизованным эремомицином по сравнению с силикагелевой матрицей позволило разделить 6 сахаров: рибозу, фруктозу, глюкозу, сахарозу, лактозу и раффинозу — за 8 минут с эффективностью до 25000 тт/м при составе подвижной фазы 15/85 об.% H2O/CH3CN и рефрактометрическом детектировании (размеры колонок 100×3 мм).