ИСТИНА

стр. 68, БТ/БИ4. Введение. Для исследования противоопухолевых препаратов в качестве переходного звена между моделями для скрининга in vitro и тестированием препаратов в организме рассматривают трёхмерные системы клеточных культур. Цель данной работы - создание 3D клеточных сфероидов на микросферах из поли-3-оксибутирата (ПОБ). Материалы и методы. Для получения пористых микросфер с диаметрами различного диаметра использовался метод «водная фаза/масляная фаза/водная фаза» (W/O/W) с последующим вымыванием порообразователя - водного раствора карбоната аммония, способного к термическому разложению до аммиака и углекислого газа. Для получения стабильных сфероидов клетки HEp-2 (рак гортани человека) культивировали совместно с пористыми микросферами из ПОБ на лунках, покрытых 1% агарозным гелем, в условиях постоянного перемешивания, температуры 37°С и 5% содержания СО2. Динамика клеточного деления и роста в сфероидах отслеживалась посредством МТТ-анализа, морфология сфероидов оценивалась визуально гистологическими методами, а также с помощью сканирующей электронной (СЭМ) и конфокальной микроскопии. Результаты. Рост сфероидов достигал пика на 7-ые сутки культивирования, после чего число живых клеток падало как в контроле (сфероиды), так и в опыте (сфероиды с микросферами). При этом при культивировании с микросферами диаметром 50-100 мкм наблюдалась более активная пролиферация клеток, чем в контроле и в сфероидах с микросферами более 100 мкм. Исследование при помощи СЭМ также показало лучшее прикрепление и агрегацию клеток с микросферами меньшего диаметра. Выводы. Подобный подход к созданию 3D клеточных моделей из опухолевых клеток с использованием ПОБ является перспективным для получения систем для тестирования противоопухолевых препаратов. Более полное понимание механизмов будет достигнуто посредством анализа экспрессии различных транскрипционных факторов и в ходе масштабирования процесса до культивирования в большем объёме с постоянной циркуляцией питательной среды. Работа получила финансовую поддержку РФФИ мк № 18-29-09099.