ИСТИНА

Сердечная форма тропонина I (cTnI) строго спецефична для кардиомиоцитов и её появление в крови служит маркёром инфаркта миокарда. Для детекции cTnI на сегодняшний день разработано немало тест-систем на основе антител. Одним из таких антител является антитело FR01 миши (MabFR01), полученное гибридомным методом. Поскольку в сыворотке крове большинства людей присутствуют human anti-mouse antibody (HAMA), способные оказывать влияние на результаты иммунохимического измерения, всё чаще обсуждается переход на тест-системы на основе химерных антител, в которых константные домены иммуноглобулина мыши заменены на константные домены иммуноглобулина человека. Культура эукариотических клеток признаны наиболее подходящей платформой для получения полноразмерных химерных антител. В нашей лаборатории ранее были получены химерные антитела chimFR01 в культуре клеток CHO, однако её уровень продукции антител оказался достаточно низким. В связи с этим, целью данной работы было получение химерных антител в другой экспрессионной системе, HEK EXPI293F, и сравнение иммунохимической активности химерных антител chemFR01, экспрессированных в HEK Expi293F и CHO, и антител MabFR01. Максимальный уровень продукции антител chimFR01 наблюдали на 6-7 день после трансфекции, он составил 180-200 мг/л. Из культуральной среды выделили 1,9 мг chimFR01. Химерные антитела chimFR01, экспрессированные в клетках HEK Expi293F и CHO, и антител MabFR01 проявляют сходную иммунохимическую активность в ФИА "сэндвич"-типа в качестве подложки, а в качестве детекторных химерных антител chimFR01 дают более высокий сигнал, чем антитела MabFR01.