ИСТИНА

Известно, что белки MCTS1 и DENR участвуют в биосинтезе белка, регулируя реинициацию трансляции и рибосомный рециклинг. Считается, что гетеродимер, формируемый этими белками, в функциональном отношении может работать как аналог фактора инициации трансляции eIF2D. Показано, что повышенная экспрессия генов MCTS1 и DENR у человека часто выявляется в лимфомах, однако детальных сведений о механизмах их вовлечённости в развитие злокачественных заболеваний крови нет. Нами был изучен вклад факторов MCTS1 и DENR в регуляцию активности сигнальных каскадов, ассоциированных со злокачественным перерождением, и изучена функциональная роль данных факторов в клетках лейкозов. Для этого методом РНК-интерференции было осуществлено подавление экспрессии соответствующих генов на уровне мРНК в злокачественных клетках крови. Далее был проведён анализ транскриптома полученных клеток с подавленной экспрессией MCTS1, и DENR, а также анализ сигнальных путей с использованием платформ аннотирования генов Oncofinder, Biocarta, Gene Ontology, NCI. Важно отметить, что среди всех дифференциально меняющихся сигнальных каскадов более половины сигнальных путей, изменяющихся при подавлении DENR, оказались общими с теми, которые меняются в ответ на подавление экспрессии MCTS1. При этом они составляют более половины всех путей, активность которых меняется в ответ на подавление MCTS1. В частности, было показано, что подавление экспрессии MCTS1 приводит к существенному ингибированию сигнальных каскадов, ассоциированных со снижением чувствительности к сигналам апоптоза. Интересно, что подавление экспрессии DENR приводило к активации этих же путей, т.е. оказывало противоположный эффект. Также необходимо отметить, что подавление экспрессии DENR приводит к снижению активности значительного числа путей, ассоциированных с ответом иммунной системы на злокачественные клетки. Анализ структурно-функциональных связей для поиска терапевтических препаратов позволил выявить целый набор низкомолекулярных соединений, которые оказывают эффект, схожий с подавлением DENR и/или MCTS1, или с их гиперэкспрессией. Далее методом генетического редактирования CRISPR/Cas9 был получен набор клонов лейкозных клеток перевиваемых линий с гомо- и гетерозиготным генетическим нокаутом MCTS1. Было показано, что нокаут данного гена или подавление его экспрессии путем РНК-интерференции приводит к существенному снижению скорости пролиферации и к значительному увеличению чувствительности клеток к химиотерапевтическим препаратам. Полученные результаты свидетельствуют о том, что исследуемые гены играют важную роль в развитии лейкозов и могут рассматриваться в качестве перспективных терапевтических мишеней.