ИСТИНА

Урокиназная система, включающая в себя протеазу урокиназу (uPA) и ее рецептор (uPAR), играет важную роль в процес- сах опухолевого роста и метастазирования. Запуская внеклеточный протеолиз, uPA/uPAR система ремоделирует матрикс, раз- рушает базальную мембрану и активирует факторы роста и цитокины, стимулирующие пролиферацию и миграцию опухоли. Повышенный уровень uPA и uPAR сопровождает метастатические опухоли и ассоциирован с неблагоприятным клиническим прогнозом, что позволяет рассматривать uPA/uPAR систему как перспективную мишень воздействия противоопухолевых пре- паратов. Известно, что uPAR вовлечен в эпителиально-мезенхимальный переход (ЭМП) опухоли, сопровождающий ее инва- зию и метастазирование. Несмотря на существенный эффект ингибиторов uPA и uPAR, снижающих скорость роста опухоли in vivo и in vitro, такие подходы не привели к желаемому терапевтическому эффекту в клинике. Есть также данные о том, что подавление uPA/uPAR стимулирует рост опухоли, поэтому определение механизмов участия uPA/uPAR системы в пролифе- рации, ЭМП, миграции и инвазии опухоли выявит новые мишени терапевтического воздействия. Мы показали, что нокаут гена uPAR в клетках нейробластомы Neuro2a с использованием CRISPR снижает их пролифера- цию (на 60%), уменьшает экспрессию маркера пролиферации Ki67 и запускает каспазозависимый апоптоз. Отсутствие uPAR в Neuro2a вызывает ЭМП, стимулирует миграцию, подавляет экспрессию эпителиальных (E-кадгерина, окклюдина и кладу- дина-5) и активирует экспрессию мезенхимальных (N-кадгерина, IL-6 и α-SMA) маркеров. Поиск механизма выявил uPA в качестве ключевого регулятора ЭМП: отсутствие uPAR на мембране Neuro2a приводит к транслокации uPA в ядро и активации транскрипционных факторов NF-kβ и Snail. Нокаут uPAR в Neuro2a увеличивает их химиорезистентность: добавление циспла- тина в клетки, не экспрессирующие uPAR, снижает экспрессию каспазы-3 и низкомолекулярной формы PARP-1 по сравнению с контролем. Эти данные предполагают новый механизм функционирования uPA/uPAR системы в опухоли, при котором uPAR, являясь «ловушкой» uPA, связывает ее на мембране и регулирует ее протеазную активность, а нокаут uPAR хоть и снижает пролиферацию клеток, тем не менее, позволяет uPA проникать в ядро и активировать экспрессию генов ЕМТ, что увеличивает миграторный потенциал опухоли.