ИСТИНА

Одной из наиболее сложных групп рода Lotus является комплекс Lotus corniculatus, включающий по разным оценкам от одного до многих видов (Kramina et al., 2018). На Пиренейском п-ове были описаны несколько видов этой группы, впоследствии переведенные в ранг подвидов L. corniculatus L. (Valdes, 2000), однако недавние филогенетические исследования поставили под сомнение принадлежность некоторых из них к комплексу L. corniculatus (Kramina et al., 2016, 2018). История. П.Э.Буассье и Ж.Ф.Рейтер в 1852 г. описали вид Lotus glareosus Boiss. et Reuter из родства L. corniculatus с тремя разновидностями: α glabrescens, β villosus и γ glacialis. К.Пау в 1922 г. перевел var. glacialis в самостоятельный вид L. glacialis (Boiss.) Pau. П.М.Е.Тимбаль-Лаграв описал вид Lotus delortii Timb.-Lagr. из юго-западной Франции, недалеко от Пиренейского перешейка (Schultz, 1852). Ч.К.Лакайта обратил внимание на особенности растений из группы L. corniculatus, произрастающих в Кастиллии, предгорьях Сьерра-Гуадаррамы и в западной Саламанке, и выделил их в отдельный вид L. carpetanus Lacaita (Lacaita, 1928). Он не обсуждал взаимоотношения этого вида с L. glareosus, но указал отличия его от L. delortii и L. stenodon Boiss. П.В.Болл и А.Хрткова-Жертова во Флоре Европы признавали самостоятельность L. glareosus (incl. L. glacialis) и L. delortii в составе комплекса L. corniculatus (Ball & Chrtková-Žertová, 1968). А.Фернандес, изучив комплекс L. corniculatus в Испании и Португалии, признал на этой территории семь видов, среди которых L. glareosus, L. glacialis (который он незаконно переименовал в L. boissieri) и L. delortii (Fernandes, 1981). Он также отметил, что все три вида характеризуются заметной зигоморфией чашечки. Б.Вальдес во Flora Iberica свел все указанные виды в синонимы к L. corniculatus и выделил подвиды L. corniculatus ssp. carpetanus (syn. L. glareosus, L. carpetanus), ssp. glacialis и ssp. delortii (Valdés, 2000). Хромосомные числа. У L. glareosus было обнаружено удивительное хромосомное число 2n=10 (x=5) (Angulo & Real, 1976; Fernandes, 1981), ранее неизвестное для рода Lotus, характеризующегося базовыми числами x=6 и x=7 (Grant, 1995). Кроме того, для этого вида упоминаются числа 2n=12 и 24 (Valdés, 2000). У L. glacialis хромосомное число 2n=12, а у L. delortii 2n=24 (Grant, 1995). Молекулярно-филогенетические исследования по роду Lotus по ITS и пластидным данным показали, что комплекс L. corniculatus монофилетичен, кроме отдельных образцов L. glareosus (Kramina et al., 2016, 2018). Ближайший родственный таксон к комплексу – средиземноморский вид L. conimbricensis Brot. Выявлено, что образцы L. glareosus разделились на две группы: группу близкую к L. conimbricensis, и группу, входящую в комплекс L. corniculatus (Kramina et al., 2016, 2018). Различия между образцами L. glareosus из этих групп очень велики: более 40 замен по ITS 1-2 и 10 замен и три вставки по trnL-F, при этом морфологически растения этих групп очень похожи. Необходимо было исследование этого вида на более обширном материале. Таким образом, целью настоящего исследования было изучение генетической и морфологической изменчивости L. glareosus и близких видов на Пиренейском полуострове и установление видовой принадлежности отличающихся молекулярно образцов. Материалы: Образцы L. glareosus, L. glacialis, L. alpinus, L. delortii, L. conimbricensis c Пиренейского п-ова и др. регионов из гербариев B, H, LE, MA, MHA, MW; популяционные выборки из Испании из Ahedo и Barriosuso (пров. Бургос), Montenegro de Cameros и Laguna Negra de Urbion (пров. Сория); типовые образцы L. carpetanus (BM); репрезентативная выборка по роду Lotus (13 секций) и три внешние группы (Cytisopsis pseudocytisus (Boiss.) Fertig, Hammatolobium kremerianum C.Muell., Tripodion tetraphyllum (L.) Fourr.); типовые образцы L. glareosus (G, только морфологический анализ). Методы: Выделение ДНК, амплификация участков ITS 1-2 ярДНК и trnL-F хпДНК с праймерами, очистка ПЦР-продукта, подготовка и секвенирование по Сэнгеру, как описано ранее (Kramina et al., 2016, 2018); выравнивание матриц по ITS и trnL-F (каждая по 93 образца); реконструкция филогении методами максимального правдоподобия (МП) и Байеса (МБ). Морфологический анализ всех изученных образцов. Результаты: Как по ITS, так и по trnL-F 13 образцов группы, именуемой «L. glareosus», образовали отдельную кладу с апостериорной вероятностью (PP) 1, в которую вошли типовые образцы L. carpetanus и образцы, собранные в Laguna Negra и, отчасти, в Ahedo, а также произрастающие в Ц. Кордильере и Сев. Иберийской Системе. Эта клада (далее будем называть ее L. carpetanus) объединяется с кладой (по ITS) или градой (по trnL-F) вида L. conimbricensis c PP=1. Другая часть образцов «L. glareosus» (далее будем называть L. glareosus) оказалась внутри клады комплекса L. corniculatus (PP=1 по обоим маркерам). По ITS они вместе с образцами видов L. alpinus, L. delortii, L. glacialis формируют отдельную западную субкладу в кладе комплекса L. corniculatus (PP=0,982). Из собранных нами образцов в эту группу вошли образцы из Ahedo (частично), Barriosuso, Montenegro de Cameros, а также гербарные образцы из разных точек Испании. Отличия образцов L. carpetanus и L. glareosus: по ITS – от 46 до 48 п.о., по trnL-F – от 12 до 14 п.о. Отличия L. carpetanus от L. conimbricensis меньше: по ITS – от 16 до 18 п.о., по trnL-F – 4 п.о. Морфологический анализ 12 образцов L. carpetanus и 9 образцов L. glareosus показал значительное сходство, однако нам удалось нащупать несколько небольших отличий: L. carpetanus характеризуется более мелкими листочками нижней пары, более длинной трубкой чашечки, постепенным сужением зубцов чашечки с короткой узкой верхушкой, тогда как у L. glareosus более резкое сужение начинается от основания или от середины зубца, L. carpetanus более заметно опушен отстоящим опушением, чем L. glareosus; цвет растения L. carpetanus серо-зеленый, L. glareosus – сизо- или светло-зеленый. Признаки L. carpetanus соответствуют диагнозу Лакайты. Типовые образцы L. glareosus по выявленным признакам соответствуют L. glareosus, а не L. carpetanus. Обсуждение: Большое число мононуклеотидных замен по изученным маркерам говорят о достаточной давности разделения комплекса L. corniculatus и клады, включающей L. conimbricensis и L. carpetanus. Современное гибридное происхождение L. carpetanus от скрещивания L. conimbricensis и какого-либо члена комплекса L. corniculatus представляется нам маловероятным, ввиду отличий L. carpetanus от обоих этих таксонов. Мы предлагаем восстановить самостоятельность вида L. carpetanus и не синонимизировать его c L. glareosus. Очевидно, что L. carpetanus не входит в комплекс L. corniculatus, хотя и слабо отличим морфологически от некоторых его членов. Современное распространение L. carpetanus, связанное с внутренними ледниковыми рефугиумами Пиренейского п-ова, может свидетельствовать о более древнем возрасте этого таксона, что требует изучения с применением методов датированной филогении.