ИСТИНА

Неинвазивные методы диагностирования заболеваний привлекают в последнее время значительный интерес медиков по всему миру. К сожалению, их число пока остается весьма ограниченным. К ним относится подход, основанный на установлении взаимосвязи характера и степени протекания легочного заболевания с качественным и количественным составом конденсата выдыхаемого воздуха (КВВ) пациента. Важным показателем, характеризующим степень протекания воспалительного процесса и связанным с балансом в организме такого биологически важного вещества, как оксид азота (II), является содержание в КВВ нитрит-ионов. Поэтому цель настоящей работы заключалась в разработке чувствительной и простой методики определения содержания этих ионов в КВВ. Большинство методик спектрофотометрического определения нитрит-ионов основано на использовании различных вариантов реакции Грисса, суть которой заключается в диазотировании ароматических аминов нитрит-ионами в кислой среде и последующем азосочетании катиона диазония с ароматическими аминами или фенолами с образованием интенсивно окрашенных азосоединений. Ранее нами было показано, что аминогруппы, входящие в состав концевых толуидиновых групп пенополиуретана (ППУ), способны вступать в реакции, характерные для мономерных ароматических аминов, в том числе и в реакцию диазотирования. В настоящей работе была изучена возможность применения ППУ в качестве полимерного хромогенного реагента для определения нитрит-ионов в КВВ с помощью спектроскопии диффузного отражения по реакции диазотирования и последующего азосочетания с 3-гидрокси-7,8-бензо-1,2,3,4-тетрагидрохинолином (ГБТГХ) – новым фотометрическим реагентом для определения нитрит-ионов, предложенным одним из авторов настоящей работы. Показано, что при взаимодействии диазотированного ППУ, полученного по реакции ППУ с нитрит-ионами, и ГБТГХ образуется окрашенный в красно-коричневый цвет продукт – полимерное азосоединение. С помощью спектроскопии диффузного отражения изучены его спектральные характеристики. Показано, что они сильно зависят от кислотности среды, что может быть использовано для увеличения чувствительности определения. Оптимизированы условия проведения реакции диазотирования и азосочетания. Изучена зависимость выхода продукта от времени контакта фаз, кислотности и объема анализируемого раствора, а также содержания в нем нитрит-ионов. Изучено мешающее влияние различных неорганических ионов при определении нитрит-ионов. Найдены метрологические характеристики методики. Предел обнаружения нитрит-ионов составляет 0,7 нг/мл. Было проведено определение нитрит-ионов в конденсате выдыхаемого воздуха здоровых людей, больных хроническим отечным бронхитом легких и бронхиальной астмой. На основании полученных результатов можно сделать вывод о том, что изменение содержания нитрит-ионов в конденсате выдыхаемого воздуха пациента может быть использовано в качестве параметра для диагностирования заболевания и контроля за его протеканием. Пенополиуретан в качестве полимерного хромогенного реагента в реакциях азосочетания обладает рядом преимуществ по сравнению с мономерными аналогами. Прежде всего, существенно облегчается завершающая стадия анализа, так как окрашенный продукт легко отделяется от других частиц, присутствующих в реакционной смеси, и может быть без каких-либо дополнительных операций использован в качестве удобной аналитической формы. С использованием ППУ можно проводить определения в мутных и окрашенных растворах. Таблетка ППУ нерастворима и нелетуча, что делает этот новый класс аналитических реагентов более привлекательным с точки зрения экологической безопасности.