ИСТИНА

Электрохимическая регистрация аффинных взаимодействий путем комбинирования распознающих элементов (молекул белков, аптамеров, антител) с наночастицами металлов – перспективное и быстроразвивающееся направление создания сенсоров. Наночастицы (НЧ) золота и серебра широко используются как в качестве «метки» в «сэндвичевом» анализе с применением классических подходов инверсионной вольтамперометрии, так и для электрокаталитического усиления сигнала. Дидодецилдиметиламмоний бромид (ДДАБ) является подходящей матрицей для включения молекул белков. Электрод, модифицированный AuНЧ в ДДАБ проявляет свойства, типичные для золотого электрода: на циклических вольтамперограммах присутствуют сигналы, соответствующие образованию оксида золота (AuOx) и его последующему восстановлению. В данной работе предложен новый способ детектирования аффинных взаимодействий, в основе которого лежит сигнал AuНЧ. В качестве модельной системы была выбрана пара белок-аптамер. Для создания аптасенсоров использовались печатные графитовые электроды, модифицированные AuНЧ в ДДАБ. Иммобилизация тромбин связывающего ДНК-аптамера проводилась через образование комплекса авидин-биотин. Эффект неспецифической сорбции был изучен на примере белка трипсина. Сигналом аптасенсора служил катодный пик восстановления оксидов золота, наблюдаемый при потенциале около 0В после 30с окисления при Е=+1.2В. Было показано, что сама пленка ДДАБ обладает способностью сорбировать O2 из буферного раствора, однако присутствие AuНЧ значительно усиливает величину катодного пика (рис.1). Легкость образования оксида золота определяется доступностью растворенного кислорода, а также свойствами поверхностного электродного слоя (зарядом, проводимостью и т.д.). Взаимодействие аптамер-тромбин на поверхности сенсора характеризовалось бóльшей площадью пика восстановления по сравнению с парой аптамер-трипсин (рис 2).