ИСТИНА

Цель исследования. Кардиомиоглобин - один из наиболее ранних биомаркеров острого периода инфаркта миокарда (ИМ). Благодаря своим небольшим размерам (молекулярная масса белка 17800), он поступает в кровь в пределах от 1 до 4 часов после приступа. Пороговая концентрация белка-маркера, превышение которой свидетельствует о ИМ, составляет около 100 нг/мл. Целью данного исследования стало создание электрохимического иммуносенсора на кардиомиоглобин для экспресс диагностики ИМ. Материалы и методы. В отличие от описанных ранее схем “сендвичевого” иммуноанализа с использованием меченных вторичных антител, предлагаемый метод основан на собственной электроактивности миоглобина и прямой детекции специфического взаимодействия между молекулами белка и соответствующими антителами. Разработанный иммуносенсор представляет собой одноразовый графитовый электрод (1см×3см), модифицированный наночастицами золота в дидодецилдиметиламоний бромиде и антителами к кардиоизоформе миоглобина. Количественное определение миоглобина в образцах плазмы крови осуществлялось путем нанесения 1мкл плазмы на рабочую поверхность сенсора (d=1.8мм) и измерения сигнала прямого переноса электрона с электрода на ион Fe(III) гема: Mb-Fe(III) + ē +H+ ↔ Mb-Fe(II). Аналитическим сигналом иммуносенсора служила площадь пика восстановления миоглобина. Вся процедура занимала около получаса. Результаты. Была проведена апробация иммуносенсора на образцах плазмы крови пациентов с ИМ и здоровых добровольцев. Количество кардиомиоглобина в образцах было измерено также с помощью системы RAMP® (Response Biomedical Corp): Таблица 1. Заключение. Достигнутый предел обнаружения кардиомиоглобина в плазме составил (10 нг/мл (0,56 нМ), что соответствует его физиологическому уровню. Разработанный электрохимический иммуносенсор может быть использован для экспресс-диагностики ИМ. Работа была выполнена при поддержке Федерального агентства по науке и инновациям (гос. контракт 02.512.11.2212).