ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
Интеллектуальная Система Тематического Исследования НАукометрических данных |
||
Миоглобин (Mb) в организме человека выполняет дыхательную функцию, способствуя поглощению кислорода из крови и его использованию в окислительных процессах, протекающих в скелетных и сердечной мышцах. В обычных условиях, в отсутствии повреждения или воспаления мышечной ткани, миоглобин в кровь не попадает. В свободном состоянии в плазме крови миоглобин высокотоксичен, так как его молекулы могут закупоривать канальцы почек и приводить к их некрозу. Конкурируя с гемоглобином эритроцитов, свободный миоглобин ухудшает кислородное снабжение тканей и приводит к развитию тканевой гипоксии. [1] Определение миоглобина важно для определения степени поражения мышечной ткани при синдроме сдавления, в акушерской практике для определения выраженности гипоксии новорожденных, в спортивной медицине для профилактики перетренированности спортсменов, в судебной медицине как дополнительный критерий отравлений этиловым спиртом и наркотическими препаратами опиатной группы. В практической медицине для установления диагноза инфаркта миокарда (ИМ) определяют наличие специфического «сердечного» изотипа миоглобина в крови, так как миоглобин скелетных мышц и миоглобин миокарда несколько различны по аминокислотной последовательности. Целью данной работы стало создание электрохимического сенсора для экспресс-диагностики ИМ. Был разработан иммуносенсор на основе антител к кардиоизоформе миоглобина. В отличие от описанных ранее схем “сэндвичевого” иммуноанализа, предлагаемый подход был основан на собственной электроактивности гемопротеина и прямой детекции специфического взаимодействия между молекулами маркера и соответствующими антителами. Количественное определение миоглобина в образцах плазмы крови осуществлялось путем измерения сигнала прямого переноса электрона с электрода на ион железа гема: Mb-Fe(III) + ē + H+ → Mb-Fe(II). Аналитическим сигналом иммуносенсора служила площадь пика восстановления миоглобина. Регистрируемый электрохимический сигнал по площади и высоте был пропорционален количеству миоглобина в образце. Для повышения чувствительности иммуносенсора были изучены различные модификаторы электродной поверхности (наночастицы металлов, золотые нанопалочки и нанопроволочки, углеродный модификатор «карбон блак» и др.). Оптимизированы условия проведения анализа (рН буферного раствора, времена инкубации и др.). Достигнутый предел обнаружения составил 5 нг/мл при «пороговой» концентрацией кардиомиоглобина в крови 100 нг/мл. Время анализа было сокращено до 20 мин. Работоспособность иммуносенсора была подтверждена на 42 образцах плазмы крови (9 от здоровых доноров и 33 от больных с острым периодом ИМ). [2, 3] 1. Палышев И.П., Вестник РГМУ 2010, 5, 69; 2. E. Suprun, T. Bulko, A. Lisitsa, O. Gnedenko, A. Ivanov, V. Shumyantseva, A. Archakov, Biosens. Bioelectron. 2010, 25, 1694; 3. E. V. Suprun, A. L. Shilovskaya, A. V. Lisitsa, T. V. Bulko, V. V. Shumyantseva, A. I. Archakov, Electroanalysis 2011, 23, 1051;