ИСТИНА

Богатые гуанином последовательности нередко встречаются в геномах. Многие из них могут образовывать G-квадруплексы (G4-ДНК). Такие четырехцепочечные неканонические структуры часто находятся в промоторных и теломерных участках ДНК и выполняют регуляторные функции. С другой стороны, G4-ДНК могут дестабилизировать геном. Одним из механизмов, поддерживающих генетическую стабильность ДНК, является система репарации неканонических пар нуклеотидов («мисматчей») – MMR (от англ. Mismatch Repair). Ранее было продемонстрировано взаимодействие сенсорного белка системы MMR MutS из E. coli и H. sapiens с G4-ДНК. Однако механизм и роль этого взаимодействия в клеточных процессах неизвестны. Также отсутствуют данные о влиянии G4-ДНК на другие белки системы MMR – MutL и MutH. В данной работе проверено влияние наличия G квадруплексов на функционирование белков начальных стадий системы MMR. Сконструированы линейные ДНК, содержащие мотив (GGGT)4, формирующий внутримолекулярный параллельный G-квадруплекс, а также GT-«мисматч» для специфического связывания белком MutS и монометилированный участок узнавания эдонуклеазы MutH. Образование G-квадруплекса было подтверждено методом «футпринтинга». Впервые продемонстрировано и охарактеризовано связывание белков MutS из E. coli и R. sphaeroides с внутримолекулярными G4-ДНК. Показано, что сродство MutS к G4-ДНК значительно превышает сродство к другим ДНК-лигандам в присутствии АТФ и особенно АТФγS. Установлено, что наличие G4-мотива не ингибирует гидролиз ДНК-дуплекса белками MutH из E. coli и MutL из R. sphaeroides.