|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
Интеллектуальная Система Тематического Исследования НАукометрических данных |
||
Мутантные формы люциферазы светляков с пониженной pH-чувствительностью спектров биолюминесценциитезисы доклада
- Авторы: Кокшаров М.И., Угарова Н.Н.
- Сборник: Тезисы докладов V Съезда Российского фотобиологического общества. Пущино
- Тезисы
- Год издания: 2008
- Первая страница: 187
- Последняя страница: 187
- Аннотация: Люцифераза светляков (КФ 1.13.12.7) катализирует реакцию окисления люциферина кислородом воздуха в присутствии АТФ и Mg2+, сопровождающуюся излучением света. Благодаря высокой каталитической активности и специфичности к АТФ, простоте регистрации биолюминесцентного сигнала люцифераза светляков широко применяется для определения АТФ и в качестве гена-маркера при изучении различных биохимических процессов. Особенностью большинства нативных люцифераз светляков является сильная pH-зависимость спектра биолюминесценции. В частности, у изучаемой нами люциферазы светляков Luciola mingrelica при понижении pH из щелочной (pH>7,8) в кислую область (pH<6,0) цвет биолюминесценции изменяется с желто-зеленого (max=566 нм) на красный (max=618 нм) [1]. Несмотря на многочисленные исследования различных люцифераз жуков, причины и механизм этого процесса до сих пор являются предметом обсуждения. С помощью случайного мутагенеза первых 225 из 548 аминокислотных остатков люциферазы светляков Luciola mingrelica были получены четыре мутантных фермента с пониженной чувствительностью спектра биолюминесценции к pH. Показано, что в результате замены F16L зависимость спектра биолюминесценции от pH заметно уменьшилась, а замены Y35N, Y35H и F16L/A40S привели к люциферазам, спектры биолюминесценции которых практически не изменяются в интервале pH 7,8-6,0 (max=564 нм). Данные по кристаллической структуре гомологичной люциферазы светляков Luciola cruciata [2] позволяют предложить возможное объяснение эффекта замены Tyr35, приводящей к практически pH-нечувствительному спектру биолюминесценции.
- Добавил в систему: Кокшаров Михаил Иванович
Прикрепленные файлы
| № | Имя | Описание | Имя файла | Размер | Добавлен |
|---|---|---|---|---|---|
| 1. | Полный текст | Сборник тезисов | 5th-RSP-abstracts-program-2008.pdf | 4,4 МБ | 14 ноября 2012 [koksharov83] |
| 2. | Presentation | Koksharov_5th-RSP-Pushchino-2008.ppt | 2,3 МБ | 22 декабря 2012 [koksharov83] |