Аннотация:В настоящее время широкое применение биохимических методов анализа и использование биораспознающих катализаторов (ферментов) в технологических процессах и аналитической практике ограничивается невозможностью их использования при определении субстратов в объектах с матрицей сложного состава, в том числе водонерастворимой. Примерами таких соединений могут служить трудно- и среднеокисляемые серосодержащие субстраты пероксидазы, такие как дибензотиофен и фенотиазины.
Один из комбинированных подходов, который может быть использован для решения таких задач, заключается в направленном выборе биокатализатора селективного и устойчивого к воздействию среды, условий его функционирования, что необходимо для эффективного превращения и последующего определения субстратов, например в водонерастворимой матрице объекта; а так же сорбента, распознающего на молекулярном уровне либо аналит, либо индикаторное вещество – продукт его ферментативной конверсии.
Для высокочувствительного и селективного определения маркеров качества нефтепродуктов дибензотиофена и лекарственных препаратов ряда фенотиазинов в качестве таких сорбентов нами было предложено использование природного полимера – хитозана с молекулярными отпечатками указанных серосодержащих соединений.
В связи с этим целью настоящей работы была разработка подходов к синтезу полимеров с молекулярными отпечатками на основе хитозана, которые, во-первых, характеризовались бы высокой сорбционной емкостью и селективностью по отношению к серосодержащим гетероциклическим субстратам пероксидазы — дибензотиофену и промазину; а, во-вторых, были бы прозрачными и могли служить в качестве основы биораспознающего слоя оптического сенсора для определения указанных аналитов.
В ходе работы были получены оптически прозрачные пленки, а также гели хитозана с молекулярными отпечатками дибензотиофена, сульфона дибензотиофена и промазина при использовании серной кислоты и глутарового альдегида в качестве сшивающих агентов и проведено предварительное изучение их сорбционных свойств. Выявлено, что применение серной кислоты приводит к образованию мутных гелей, в то время как использование глутарового альдегида позволяет получить оптически прозрачные гидрогели.
На основании проведенного эксперимента установлено, что для получения хитозана с молекулярными отпечатками сульфона дибензотиофена и промазина более перспективен способ ковалентной «сшивки» полисахарида при мольном соотношении глутаровый альдегид:глюкозамин хитозана = 2:1.
Показано, что эффективными растворителями для количественного извлечения сульфона дибензотиофена и промазина из полученных полимеров на стадии синтеза являются диметилсульфоксид и вода соответственно. Для дибензотиофена такие сведения отсутствуют, поскольку на этом этапе работы не удалось подобрать органический растворитель, который бы обеспечивал эффективное удаление темплата без разрушения матрицы.
Предварительные данные о сорбционной селективности гидрогелей хитозана с молекулярными отпечатками промазина свидетельствуют о проявлении ими большей распознающей способности в отношении темплата по сравнению со структурно-родственными соединениями.