ИСТИНА

Введение. Известно, что активный транспорт ионов Са2+ через мембрану саркоплазматического ретикулума (СР) происходит за счет энергии гидролиза АТФ, осуществляемого Са2+–АТФазой CР. Ингибирование транспорта Са2+ изменяет соотношение внутри и внеклеточного содержания Са2+, что предотвращает образование тромбов и адгезию метастатических клеток к эндотелию капилляров, предотвращая рост метастазов. Цель исследования. Целью настоящего исследования является изучение влияния новых катионных динитрозильных комплексов железа с тиокарбамидом и его алифатическими производными – новых синтетических аналогов природных доноров NO на ферментативную активность Са2+–АТФазы CР. Материалы и методы. Исследовались соединения [Fe(C3N2H8S)Cl(NO)2]0[Fe(NO)2(C3N2H8S)2]+Cl- (I), [Fe(SС(N(CH3)2)2(NO)2]Сl (II), [Fe(SС(NH2)2)2(NO)2]ClH2O (III) и [Fe(SС(NH2)2)2(NO)2]2SO4H2O (IV). Фермент Са2+-АТФазу СР выделяли из белых мышц задних конечностей кроликов, удельная активность Са2+ –АТФазы составляла 15000 нМ/мг белка/мин. Гидролитическую активность Са2+ - АТФазы рассчитывали из тангенса угла наклона кинетической кривой гидролиза АТФ. О скорости изменения концентрации ионов Са2+ судили по кинетике их поглощения везикулами СР. Обратимость действия исследованных соединений определяли путём диализа буферного раствора Са2+–АТФазы СР, содержащего 1×10-5М соединений (I)-(IV). Диализ проводили против 100-кратного избытка буферного раствора в отсутствии комплексов в течение 24 часов при 4ºС. Результаты и выводы. Показано, что нитрозильные комплексы железа (I) - (IV) полностью тормозят транспортную и гидролитическую функции Са2+-АТФазы СР в 1×10-4М концентрации. В 1×10-5М концентрации они на (57±6)%, (75±8)%, (80±8)%, (85±9)% тормозят активный транспорт Са2+ и на 0%, (40±4)%, (48±5)% и (38±4)% гидролиз АТФ, соответственно. Комплекс (II) обратимо и неконкурентно тормозит гидролитическую функцию Са2+ - АТФазы СР с Кi=1,7×10-6М, что указывает на нековалентное связывания соединения с ферментом и предполагает его влияние на структурно-функциональное состояние мембраны СР. Полученные данные позволяют предположить наличие у соединений (I) – (IV) антиметастатической активности. Исследования поддержаны Программой Президиума РАН №1 «Наноструктуры: физика, химия, биология, основы технологий».